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1、發酵車間生產設備操作及工藝流程作業指導書編 制： 審 核： 批 準： 版 本 號: ESZAQDGF001 編 制： 審 核: 批 準： 發 布： 二XX年X月1崗位設備以及工藝流程1.1設備流程配料罐種子罐發酵罐離心機冰柜1.2工藝流程菌種斜面種子罐發酵罐低溫冷藏離心分離配料PH值檢測、鏡檢1.3崗位設備一覽表序號設備編號設備名稱規格型號數量（臺）1FJ1配料缸Vg4m12FJ2種子罐Vg0.65m23FJ3發酵罐Vg5.4m24FJ4離心機25FJ5螺桿泵IIB26FJ6空氣過濾器YUD247FJ7精過濾器JPF248FJ8空氣預過濾器JLSYUD1512車間操作控制程序2.1配料操作一、2、配料操作1、配料前將配料缸清洗干凈，并目測檢查當天所需各種原輔料的品質和是否備齊。2、嚴禁使用污染變質或規格不合的原輔料，以及用渾濁的水源配料。3、在配料桶內注入適量的工藝水，種子罐注入0.15m3，發酵罐注入0.45m3，通入蒸汽，開啟攪拌器，將水加熱至60左右，投入稱量好的原料。按白糖、豆餅粉、玉米漿、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、泡敵的順序依次將稱量好的原料在攪拌狀態下加入配料缸。每加一種原料需完全溶解或分散均勻后方可再加入另一種原料。無機鹽及泡敵應在最后用少量水分別溶解或分散后加入。4、待配料缸內的物料安全充分攪拌均勻后，用12N鹽酸或12N氫氧化鈉將料液的PH值調至6.00.1。5、將混勻的物3、料在攪拌狀態下，用泵打入種子罐或發酵罐，然后用工藝水清洗干凈配料缸后定容。6、認真填寫配料記錄，以備核查。2.2空消操作規程1、滅菌前的準備：(1)、滅菌前應將罐清洗干凈，并認真檢查罐內各附件是否松動脫落，各種管道、閥門、壓力表、溫度表有無漏氣，失靈或堵塞情況。如有異常，應及時修復。(2)、滅菌前必須逐段排盡蒸氣管內的冷凝水。(3)、滅菌前通知鍋爐房保持供汽量，并保證車間分汽缸上的蒸汽壓力大于0.3 Mpa。(4)、通知空壓機房啟動空壓機，發酵工段用空氣壓力不小于0.25Mpa，同時循環水也要及時到位。2、空罐滅菌(1)、滅菌前，應將手孔或人孔蓋好，加墊圈并緊固螺栓。(2)、打開進汽閥門及各排4、汽閥，同時打開底閥排盡冷凝水，并嚴格執行空消條件：發酵罐0.15mPa60min 291，種子罐0.12Mpa，60min，1251。(3)、在空罐滅菌的同時，要進行接種等有關管道的滅菌。(4)、滅菌結束后，為避免罐壓急速下降造成負壓，不可立即通入冷卻水冷卻，否則罐內壓力驟降，形成強烈負壓危及罐體安全，而應當通過排汽閥門均勻緩慢排汽降壓，直至掉零，待溫度降至70左右時方可打開料孔投料。(5)、注意事項：為了保證設備的使用壽命，加熱及冷卻時無特殊情況應緩慢進行。3、空氣過濾器及其管道滅菌：(1)、空氣精過濾器的滅菌條件為0.120.14MPa，60min，溫度不高于125，并與空罐滅菌同步進行。5、(2)、滅菌結束后的空氣管道一定要通入無菌空氣保壓，保持壓力為0.2MPa左右。(3)、注意通過各管道的特殊閥門排汽，以便消除死角2.3實消操作規程1、進料完畢，核對定容量(種子罐0.28立方米，發酵罐3立方米)，開啟攪拌器，復核PH值，然后關緊料孔(手孔或人孔)。2、夾套升溫。先全開夾套冷凝水閥門，關閉冷卻水出入口閥門。若夾套內有積水，應排盡。接著打開蒸汽總閥，關閉泄壓閥，調節壓力至0.2MPa，再打開夾套進汽閥。應注意夾套壓力不得大于0.1MPa。3、當夾套升溫至90時，停止夾套進汽，按順序打開各路罐內進汽閥，底部進汽閥稍開，以免形成泡沫上升沖頂。同時注意液面上各小排汽閥要充分排汽，盡快使6、溫度達到保壓溫度，罐壓升至規定壓力后開始保壓并經常觀察起泡情況，調節罐壓，使之穩定，并嚴格執行好種子罐、發酵罐的滅菌條件。種子罐：0.12Mpa，15min，138；發酵缸：0.1Mpa，10min，121。4、保壓結束，依次關閉各排汽閥，進汽閥底部泄汽閥及蒸汽總閥。同時關閉夾套冷凝水閥，打開冷卻水出口閥。然后打開空氣進汽閥保壓至0.1mPa，打開夾套冷卻水進口閥快速保壓降溫。5、隨時觀察罐壓和降溫情況，當罐溫降至35時，關閉夾套冷卻水讓其自然降溫至30，等待接種。6、注意事項： (1)、蒸汽進入夾套預熱時，應同時打開排汽口，充分排除罐內空氣。 (2)、滅菌過程進出蒸汽量要大，盡可能采用三路蒸7、汽直接進內層。其目的，一是為了使取樣口和底部閥門的管道內料液滅菌充分，防止可能存在的死角；二是為使罐內料液翻騰均勻。(3)、滅菌到達規定時間后，應先關閉各排汽口，后停止進入蒸汽。只有當罐內壓力低于空氣過濾器壓力時，才能引入無菌空氣，以防止培養液倒流。然后立即冷卻，要注意罐內壓力變化，以防跌零。(4)、冷卻開始前，一定要先通入無菌空氣，以防抽吸外界空氣造成污染。與此同時，接種管道也必須同時通入無菌空氣，保持正壓，使之處于無菌狀態。(5)、在滅菌過程中，由于蒸汽冷凝水會使料液體積增加，影響定容的正確性，因此配料前定容時應考慮冷凝水因素，還應在滅菌前充分排除蒸汽管道內的冷凝水。2.4、接種操作規程（8、1）種子罐接種操作：1、稍開接種嘴管閥，使之保持正壓，在火圈保護下卸下接種嘴外套。2、在火焰處取下接種瓶皮管頭上牛皮紙和紗布，迅速將皮管套在接種嘴上，并盡可能套緊。3、通入無菌空氣使罐壓升至0.15MPa0.18MPa，然后將接種瓶舉高，瓶口往下傾斜，稍開大罐蓋上的排汽閥，使罐壓降至0.08MPa，利用壓差，將種子瓶中的種子液全部吸入種子罐內。4、如一次不能全部吸入，則重復上述操作過程，直至種子液完全吸入為止。然后關閉接種嘴管閥，恢復罐壓至0.1MPa，即可開始計時培養。（2）發酵罐接種操作：l、當種子培養結束，而發酵罐料液溫度降至30時，即可開始移種。移種管道必須事先滅菌和保壓。2、先關閉移9、種管邊上的各排汽閥，再打開移種管道上各閥門，將種子罐壓提高到0.150.18MPa，利用壓差將種子罐培養液全部壓入等待發酵的發酵罐內。3、移完種后，立即關閉發酵罐上的移種管道進料閥，恢復壓力至0.1MPa開始計時培養。4、移完種后，馬上用工藝水沖洗移種管道，然后再用蒸汽吹洗滅菌。2.5看罐操作規程1、實罐滅菌結束后的罐，看罐人員應認真檢查閥門，作好保壓降溫工作。嚴防培養基倒流，為此罐壓應比精濾壓力低0.05Mpa左右，溫度降低至35時，停止夾套冷卻水讓其自然降溫，并通知有關人員準備接種。2、在培養中，按工藝要求正確控制各罐的溫度、壓力、通風量、PH值等工藝參數。3、認真交接班，交接班雙方應交待10、清楚各罐情況及臨時規定的特殊操作條件。(事故狀態下嚴禁交接班，發生事故當班人員應積極協助接班人員作好處理或領導已到場通知當班人員可交接班。)4、按規定時間認真作好各種數據記錄。5、遇機械設備發生故障或工藝條件不能正確實施時，應及時報告，并記錄在臺班記錄上。6、軸封盤內經常保持機械密封的冷卻水，冷卻水應干凈，生產完后軸封盤內水應全部清除干凈，以免生銹。2.6離心分離操作規程1、首先要清洗干凈離心機及濾袋，以及菌絲體盤，桶及各種工具，打掃地面衛生。2、按要求放置好濾袋及放料橡膠管，首先啟動離心機空轉，觀察運轉是否平衡正常。3、將放料的發酵罐加入壓縮空氣至壓力為0.15Mpa左右，打開底閥及切換閥門11、，只保留離心機問的放料閥處于關閉狀態。4、緩緩打開放料閥，讓料液均勻流入離心機中，放料至適量時關閉放料閥，讓離心機內的料液甩干。5、停掉離心機，用手將濾餅取出盛入菌絲體盤，取干凈后再進行下一次離心。使用多次的濾袋要用熱水清洗干凈后再重新使用，直至全部料液分離完畢。6、分離出的菌絲體要準確稱量，并記下批號，及時交給管理人員妥善冷藏。7、清洗布袋、離心機及各種容器工具，打掃干凈環境衛生及清洗料液完后的發酵罐、出料管，填好臺班記錄。3正常生產作業程序3.1異常情況的緊急處理措施1、遇到停電時，則攪拌停止，空壓機停止工作，此時，看罐人員應及時將發酵罐或種子罐進氣閥門關掉，再將排氣閥關掉，以便維持一定罐12、壓。同時防止培養液倒流引起管道及過濾器污染，然后再向有關負責同志反映，以便采取必要措施。2、一旦確認種子罐染菌(需經菌種室監控人員及負責人確認后)，則及時用高壓蒸汽直接滅菌后排放，絕對不能往下道工序移種。3、發酵罐前期染菌則用蒸汽滅菌后放掉，中期染菌一是加入適量的殺菌劑，抑制雜菌生長；二是降低培養基溫度來控制雜菌的生長速度。如采取上述兩種措施仍不見效，就要考慮提前放罐。4、染菌后的罐體用甲醛等化學物質處理，再用蒸汽滅菌(包括各種附屬設備)，再次投料前，要徹底清洗罐體、附件，同時進行嚴密程度檢查，以防滲漏。3.2車間消毒操作本操作規程對于發酵車間環境、設備內外和管道內外的定期消毒采用的是熏蒸消毒13、法。一、熏蒸車間環境：主要是發酵車間地面、地溝、鋼平臺、離心間、冰柜間應執行每周星期五消毒一次。二、對于熏蒸設備及管道主要指標：發酵工段：配料缸、種子罐、發酵罐。三、熏蒸消毒操作1、熏蒸消毒劑使用二氧化氯用于設備309二氧化氯配12kg水，使用濃度200pp。2、把車間環境、設備內外，管道清洗干凈后，按20ml/m2(車間)、20ml/m2(設備)的劑量進行核算所用殺菌劑的數量，使用濃度根據二氧化氯的使用方法配制。3、把稱量好的二氧化氯按1桶/20m2和1桶，罐消毒殺劑等分后置于幾只玻璃瓶中。4、按1桶/20m2和l桶/罐消毒殺菌劑的比例置于地面和罐內，并保持車間密封和罐體密封與罐體相通的管道14、閥門開啟，與外界相通的閥門關閉。5、每次密封熏蒸不少于24小時。6、熏蒸完畢，取走熏蒸塑料桶，并用干凈的清水(溫度70)沖洗設備后即可。四、對于發酵的種子平臺、發酵平臺、冰柜間一星期星期五用新潔爾滅、過氧乙酸拖地、噴灑。工藝控制指標3.3設備清洗一、設備清洗1、清洗設備前應先將罐內熏蒸瓶子取出。觀察罐內是否有異物、異味和緊固螺絲是否松動脫落。2、將罐體，配料缸用工藝水沖洗干凈，按堿、清水、酸、清水的次序清洗各罐體和移種管道。堿和酸應先在配料缸內配好交化驗測定后方可清洗，濃度為1.52，溫度為6070。3、不用CIP清洗的批次，就加入適量的水至配料缸內，加熱至70后清洗。4、種子罐移種后，罐體和15、移種管道的清洗：移種完后先把種子罐壓力卸零打開底部排污閥和手孔，用工藝水馬上沖洗移種管道和種子罐，待水流盡后關閉底閥加水至打泡漿處打開攪拌，夾套升溫至70，攪至少60mm后排放，再用工藝水認真清洗直至干凈。5、發酵罐離心后的清洗，泄壓后加入適量的水至罐內，加壓先清洗離心放料管，待水和壓力排完后用水管從取樣口反沖進罐進行清洗，結束后用蒸汽吹I2min。壓力泄完后將人孔打開人下到罐內進行清洗直至干凈。二、注意事項：1、CIP清洗一般35批清洗一次。(如設備有異味，59月或生產間隙時間過長、特殊情況可增加清洗次數和力度。)2、酸堿配制和清洗時應注意安全，穿戴好防護用品。3、清洗時應注意沖洗罐體內壁及16、其他附件，避免死角。4、酸堿清洗時應用水沖洗地面，稀釋排除的酸堿濃度，保護地面設施。5、清洗結束后，應及時認真填寫臺班記錄。3.4發酵液的收集處理和排放規定為了防止菌種隨發酵液或其它途徑而流失，現對菌絲體廢液的收集處理和菌絲體的保藏、領用等手續作如下補充規定。1、每批發酵所產生的廢水和離心分離時沖洗菌絲體的廢液，實行全程跟蹤，生物氧化滅活后排放處理，避免因廢液未處理排放而造成菌種流失。自即日起發酵工段與環保工段雙方應建立發酵廢水數量和時間水移交手續，手續具體辦法是環保工段值班人員在發酵工段臺班記錄表上簽名認可接納數量，然后在本工段詳細記錄生物氧化等環保處理的條件和排放時間，并收此記錄報交調度室17、，若因廢水未經簽字移交而導致污水未經處理亂放，除承擔環保部門的罰款之外，公司按照違規處罰。2、在菌絲體和發酵廢液里均含有可產B-D呋喃果糖苷酶的菌種，它們與菌種一樣同屬企業核心機密，未經上級批準，一切形式的外流均應承擔泄密法律責任。3、加強菌絲體入庫前和入庫后的冷藏保管，嚴格執行所有的出入庫手續。嚴防菌絲體被盜竊。4、嚴格執行公司保密制度，菌種室工作人員以及車間所有接觸菌絲體的人員必須遵守保密制度。4 崗位記錄表格及填寫要求.序號表格名稱填寫要求編號流轉程序備注1崗位記錄每1小時填寫一次，字跡工整，記錄真實。崗位人員填寫工藝質量作業長車間主任生產總監。2糾偏記錄1.記錄好不符合項；2.詳細填寫糾偏措施；3.填寫好驗證結果，措施是否有效。4.按程序流轉。崗位人員填寫車間主任復核生產總監審核。3設備保養卡發生時填寫：時間、檢修部位、更換配件、效果評定、檢修人員崗位人員填寫設備安全員復核車間主任審核報生產考核部備案。5 服從車間主任及其他領導安排的其它工作。