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1、行為實驗室人員進出流程及實驗預約管理制度 編 制： 審 核： 批 準： 版 本 號: ESZAQDGF001 編 制： 審 核： 批 準： 版 本 號: 行為實驗室管理制度一、 目的：嚴格控制動物實驗環境不受病源微生物的危害；保護動物的福利；維持環境的生物潔凈度；確保動物實驗環境的一致性。規范使用操作，更好發揮公共平臺功能。二 、參考文件：實驗動物管理條例（中華人民共和國國家科學技術委員會令第588號，2011），實驗動物 環境及設施（中華人民共和國國家標準，GB 14925-2010/XG1-2011）。三、規章制度1.人員管理1.1門禁系統只對登記過的合格人員開放，動物實驗人員須經培訓后方2、可進入屏障系統工作。1.2與動物實驗無關人員以及外來人員，如需進入，須由該設施管理人員陪同進入。1.3人員進出屏障系統請嚴格遵守行為鼠房人員進出流程。1.4在屏障系統內，人員應注意保持安靜。人員從一開始進入行為實驗室的更衣室到離開行為實驗室，均禁止高聲交談。1.5 禁止在屏障系統內使用手機。1.6在屏障系統內，人員進出時不能同時開啟兩扇門，并做到隨手關門。1.7 人員進行實驗請嚴格遵守行為實驗規程。1.8實驗人員禁止更改行為實驗室內空調設置、小鼠飼養間照明開關和各種時控開關等。1.9 實驗人員不得拆卸或移動儀器設備的硬件設施，不得更改儀器設備的固定參數設置。禁止移動房間內的儀器設備，未經允許不3、得將外面的儀器設備帶入實驗室內，個人的儀器設備不得占用公用儀器設備空間。1.10 實驗人員應愛護動物實驗室的儀器設備，實驗時如發生儀器設備故障或損壞等意外情況，請在實驗登記本上填寫，并及時通知管理人員。1.11 在屏障系統內進行實驗操作，應注意無菌操作，謹防病原傳播。2、物品管理：2.1與實驗無關的物品(如手機、U盤等)，不準帶入屏障系統。2.2動物房負責統一提供筆、紙張、脫脂棉等易耗品。除此之外，個人實驗所需的耐高溫高壓滅菌的物品，統一交給動物房，經121、30分鐘的高溫高壓滅菌處理，并確認滅菌指示紙達到安全狀態后，才可進入行為室內。2.3不耐高溫高壓滅菌的物品，如果可以浸泡處理的，須將物品4、交給工作人員，在指定消毒液中浸泡半個小時后，方可進入行為室。如不能浸泡處理的，須將物體表面用消毒液擦拭干凈，并用消毒液噴霧消毒，放在傳遞窗中紫外燈照射30分鐘后，從傳遞窗內側帶入屏障系統。2.4更換下來的籠具、飲水瓶等物品放到傳遞窗，關好傳遞窗的門，人員出去后，從外面打開傳遞窗，取出物品，放到清洗間內。2.5使用過的廢棄針頭、刀片等尖銳物體請放到利器盒內，針筒請扔到普通垃圾筒中，由動物房工作人員統一處理，嚴禁隨意丟棄！3、實驗動物管理：3.1進行行為實驗的小鼠必須是通過神經所動物房定購的，或者來自神經所屏障系統動物房，禁止將其他來源的小鼠帶入行為室。3.2未經檢疫的小鼠或者清潔級以下的小鼠不得5、進入六樓行為實驗室內。3.3不得將大鼠或其他實驗動物帶入六樓行為實驗室內。3.4實驗動物傳遞為單向傳遞（如下圖所示）：屏障系統隔離1周動物房購買的小鼠行為實驗室普通級鼠房屏障系統內小鼠其他實驗處理或者安樂死3.5禁止將行為實驗室的小鼠再放回屏障系統動物房內飼養，已經拿出行為室的動物嚴禁再次返回； 3.6實驗人員應經常（每周不少于2次）查看自己的實驗小鼠。3.7 每籠動物數不得超過5只，對于掛紅牌的籠盒必須及時分籠，避免影響動物健康；3.8不準虐待動物；不準在行為實驗室內處死動物。3.9工作人員或實驗人員如發現有動物死亡時，應立即取出動物尸體，用塑料袋包裝，在標簽牌及動物死亡記錄表中登記動物死亡6、數、日期，并及時更換該鼠籠、籠蓋、飼料及飲水瓶，最后離開時將動物尸體一并帶出；3.9逃逸鼠的處理：取放小鼠要小心，用完后一定要將蓋子蓋緊，不要留有縫隙，以免小鼠逃逸。工作人員或實驗人員一旦發現逃逸鼠，應立即處死。3.10動物尸體用塑料袋包裝后放入指定冰柜，集中焚燒處理。3.11實驗結束后小鼠的處理：行為實驗結束后，請及時將小鼠移出行為實驗室，并完成行為實驗使用申請表。如連續四周沒有進行過任何實驗的小鼠，并未作說明的，工作人員有權對小鼠做出處理。動物行為平臺內的小鼠房是專門用來暫時放置即將進行行為實驗小鼠的場所，禁止用于長期飼養或繁殖小鼠。每次實驗后，實驗者應該盡快對小鼠房進行清理（例如：不應該7、將鼠籠放在地上）。對于某些實驗者在動物行為平臺小鼠房內繁殖小鼠的現象，一經發現，將進行通報批評，并且取消2個月的動物行為平臺使用資格。4、行為實驗預約管理4.1嚴格執行預約制度，每次實驗前必須提前登陸中科院預約系統進行預約。 4.2提前一周預約。如果將要進行對動物年齡有嚴格要求的實驗，提前兩周預約。4.3沒有預約禁止進行實驗！如果你沒有提前預約，但是正好當天臨時要做實驗，即使房間是空閑的，在實驗開始前也一定要在網上預約登記，以免發生時間沖突。4.4實行優先權制度: 每次所預約的時間不得超過10天。10天后的時間，如果無人預約，則可以繼續預約。如果10天后有其他人預約，則其他人有優先權。4.5預8、約時間超過10天的需要提前跟工作人員申請，工作人員根據實驗安排情況安排實驗時間。4.6 如果單個實驗室占用時間很長，其他人員可根據需求申請更改。4.7實驗計劃有變動時，請及時在網上更改預約時間。4.8嚴格按照預約時間進行實驗。4.9對于預約后不用（網上預約記錄和實驗登記不符合），或者沒有預約就進行實驗者，一經發現，動物管理委員會將對其進行通報批評，并且取消其預約權力2個月。 行為實驗室人員進出流程1. 人員進行為室流程：將外套掛在六樓大廳衣架上簽寫人員進入動物設施通用登記表 / 實驗動物領用登記表 門禁刷卡 將自己的鞋放在門口赤腳進入更衣間戴手套戴口罩打開一套無菌服將無菌服袋子放在架子底層的籠9、子內穿戴無菌服上衣將頭發包裹在無菌服帽子內穿戴褲子將上衣收進褲腰內，并將褲子上的帶子收緊穿鞋套75%乙醇噴霧凈手打開風淋室門啟動按鈕關閉進口門全身轉動風淋30秒打開出口門進入工作走廊右轉到出口處更換行為室內拖鞋開始工作或實驗。2. 人員離開行為室流程：實驗/飼養工作完畢后整理工作臺面 打掃實驗室內衛生，保持清潔關閉實驗室內照明（嚴禁關閉小鼠飼養間照明開關）關閉房間門將實驗廢棄物放至傳遞窗內將傳遞窗關好將拖鞋放回鞋架上進入出口間關閉內走廊門按出口開關從出口離開將廢棄飼養籠具放至清洗間將更換下的無菌服放在指定收集箱內，手套、口罩等物品放入垃圾桶內 穿好自己的鞋離開動物房；行為實驗流程1.開始實驗前10、需填寫行為實驗室使用申請表進行登記。2. 網上預約實驗。3. 提前兩周從公司訂購動物放至六樓屏障系統內，一周檢疫合格后將動物轉移至行為實驗室內；或提前一周將屏障系統內動物轉移至行為實驗室內，轉移方法請參照行為室實驗動物轉移規程。4. 將動物在行為室內飼養三天以上再開始行為實驗。5. 實驗開始前將實驗動物轉移至實驗間適應至少半個小時。6. 嚴格按照預約時間段開始實驗并填寫實驗記錄。7.實驗開始前在每個房間門口的登記本上登記，并將門上的牌子翻至 實驗中 請勿進入， 結束時間一開始不要填寫，請結束時再填寫，以便大家了解當時實驗室的實時使用狀態。8. 根據儀器使用說明進行實驗。9. 實驗人員在實驗結束11、后應立即關閉儀器電源，隨后再清除儀器內外各種實驗污垢，并按照要求對儀器進行清洗消毒，謹防病原傳播，并延長儀器使用壽命。 10.清理實驗臺及地面，將垃圾帶出房間。11. 關閉實驗房間照明，關閉房門，將牌子翻至 實驗結束。12. 將實驗小鼠放回飼養間原位。13. 實驗數據請放至桌面animal公共使用里面，然后到神經樓517自帶U盤將數據拷走，禁止將U盤帶入屏障系統內。行為實驗人員操作規程1. 超凈臺使用規程：打開電源 75%酒精噴霧工作臺面 無菌操作 結束后消毒液噴霧并擦拭臺面、整理相應物品 關閉電源；2. EVC使用規程：2.1取下的籠盒必須在超凈臺內完成實驗操作，嚴禁在地面上操2.2結束后將12、籠盒放回原位并插緊，檢查籠盒位置防止動物窒息死亡；2.3每籠動物數不得超過5只，對于掛紅牌的籠盒必須及時分籠，避免影響動物健康；2.4禁止在EVC及普通籠盒上用記號筆書寫信息，這樣在更換籠盒后容易造成信息誤導，而且請統一使用標簽卡片；2.5動物標簽卡片只能保留一張，嚴禁多張疊放避免混淆；2.6飼養室超凈臺頂部嚴禁堆放各種物品。3. 動物標簽的使用規程：3.1標簽卡槽內只允許擺放最新的標簽，保證每盒一張避免混淆；3.2每個實驗籠的卡片上請填寫實驗小鼠的名稱、數量、日期；使用者姓名的全稱、使用者所在課題組組長姓名的中文全稱； 需要特殊飼養要求的，請將要求寫在另一塊卡片上，掛在籠子上。3.3轉基因動13、物的標簽信息按照命名要求規范書寫；4. 傳遞窗使用規程：4.1任何物品進入傳遞窗前必須用消毒液表面噴霧；4.2嚴禁傳遞密封的盒子或容器，如一定要使用必須先噴霧消毒再完全打開后放入傳遞窗紫外消毒；4.3由于紫外燈滅菌效果局限，各組將實驗記錄本上的重要信息寫在紙上再通過傳遞窗；4.4動物傳遞紫外照射時間15分鐘，其余物品一律30分鐘；4.5依據傳遞窗內放置的時鐘算好滅菌時間，并嚴格按物品內容填寫傳遞窗使用登記表；5. 動物安樂死流程：將待處理動物放入容器內并蓋緊 打開CO2鋼瓶旋鈕約30秒 （小鼠），60秒（大鼠） 觀察并確認動物死亡狀態 關閉鋼瓶旋鈕打開籠蓋取出動物尸體 專用垃圾袋打包后放入指定14、冰柜中；注意事項：禁止旋擰壓力表上已經設置好的旋鈕；使用者應認真遵守以上規則，如發現有違規操作者，第一次給本人及研究組組長發信警告，并取消預約權利一周，第二次交動物管理委員會警告批評，并取消預約權利兩周，第三次全所通報批評，并取消預約權利兩個月。 行為鼠房飼養規程1. 將EVC籠盒在超凈臺內打開使用消毒好的鑷子輕輕抓取小鼠將小鼠輕輕放至新的EVC籠盒內完成更換。2. 根據飼養籠位數量制定換籠、添水、加料、消毒等工作時間，每周更換墊料、水瓶一次。3. 禁止更改每籠小鼠的更換墊料時間。4. 工作時請盡量輕拿輕放，減少噪音產生。5. 每日工作結束后用消毒液擦拭架子表面、桌面及拖擦飼養室地面、公共走廊15、及出入口，噴霧消毒并做好工作記錄；6. 每周四上午8：00-10:00對整個屏障系統噴霧消毒，并用消毒液拖擦墻面、門縫、天花板和高效出風口，各房間回風口過濾網用消毒液清洗干凈；7. 兩周更換食槽、籠蓋一次，兩周清理EVC回風口一次。8. 更換的籠蓋、籠盒如有多余必須歸還到飼養室存放架上，禁止隨手丟在超凈臺內或飼養室地面上；9. 根據動物數適量添加飼料，防止添加過多影響飼料品質和籠盒內環境，懷孕母鼠可適量投放葵瓜子、大麥、雞蛋等增加營養；10. 純水若少于飲水瓶容量的1/3時需更換，發現漏水瓶及時更換；11. 損壞籠具請及時處理。12.籠盒的清洗以四角不留污垢為標準，晾干后裝填墊料待高壓；13.16、每籠盒添加墊料一碗，結束后必須將儲存箱蓋好；行為室實驗動物轉移規程屏障系統內小鼠轉移到行為實驗室方法在屏障系統內將小鼠IVC籠盒放入傳遞窗（禁止打開籠蓋），人員出屏障系統取出籠盒再放至行為實驗室傳遞窗內，消毒液噴霧籠盒表面，紫外線照射15分鐘后，在實驗室內將籠蓋打開，將小鼠放入預先準備好的籠盒內。注：EVC小鼠飼養間照明程序為： 早上5:00-下午5:00 照明 下午5:00-早上5:00 黑暗飼養一房間（EVC）墊料更換表： 每周一上午8:00-10:00 1號籠架 每周二上午8:00-10:00 2號籠架飼養二房間（平板架）墊料更換表： 每周二上午10:00-11:00 每周四上午8：0017、-10：00消毒時間，請大家安排實驗時避開此時段。從公司購買的小鼠需要先放到神經樓6樓IVC鼠房隔離一周，并抽取2%的小鼠進行檢疫，檢疫合格后才能轉移至行為實驗室。因此請在實驗開始前兩周訂購SPF級動物，并且訂購時請多訂購2%的動物用于檢疫。Behavior LabRoom 7 Room 1Room 6Animal Room 1 entrance air shower entrance 1mexitdoorTransfer windowRoom 3 Room 2Room 4 Room 5 Surgery Room 221Animal Room 2 Room 1： Social Behavior18、; Novel Object Recognition; LocomotionRoom 2： Fear Conditioning; Prepulse Inhibition of startle (PPI), Fear-potentiated startle (FPS); Passive and Active AvoidanceRoom 3： Conditioned Place Preference； Tail Flick；Von Frey Hairs； Hargreaves Test； Formalin Test; Footprint Pattern; Hot Cold Plate;Room 419、： Water Maze; Rotarod; Von Frey Hairs；Room 5： Open Field; Forced Swimming Test; Tail Suspention Test; Light-Dark Exploration; Elevated Plus Maze; Novelty Suppressed Feeding Test; Balance- Beam Test ;Room 6：Tube TestRoom 7: EEG; Epilepsya (Kindling); 24h Home Cage Video Recording Surgery RoomAnimal Room 1: 200 cages Animal Room 2: 40 cages