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2013山東省警官總醫(yī)院檢驗樣本采集手冊17頁
2013山東省警官總醫(yī)院檢驗樣本采集手冊17頁.doc
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上傳人:職z****i 編號:1322133 2025-03-04 16頁 76.04KB

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1、檢驗樣本采集手冊 護理部山東省警官總醫(yī)院 院感科 聯(lián)合制訂 檢驗科 2013版患者準備根據所采樣本的類型何所分析的物質而定。樣本采集前患者的狀態(tài)對檢測結果有一定影響,不同檢測項目對樣本采集前患者的狀態(tài)有不同要求。許多非疾病因素,如是否空腹、精神狀況、體力活動、使用藥物等都可能影響檢驗結果。因此,在樣本采集前,要根據需要對患者做好相應的準備。1、一般要求患者處于安靜狀態(tài),晨起時的精神、體力、情緒等因素的影響較少,是大部分樣本采集的最佳時間。2、患者最好停服干擾檢測的藥物。3、許多檢測對飲食和藥物有特殊要求,如靜脈采血前至少要空腹8小時。4、血脂測定需禁食12-14小時后采血。5、情緒緊張會使血糖2、升高。6、嗎啡、可卡因可使淀粉酶升高。7、微生物培養(yǎng)最好在使用抗生素前。8、采血之前按摩前列腺可引起酸性磷酸酶、前列腺特異抗原的升高。9、尿液檢查按不同項目分別留取晨尿、隨機尿、計時尿。10糞便潛血檢查前要素食,禁食含動物血的食物。采集樣本所用材料的安全處置為確保醫(yī)務人員及患者的生命安全,采集樣本所用材料應安全處置。所用消耗材料如手套、棉簽等應當作為醫(yī)用垃圾處理,所用的利器如針頭應放入銳器盒當做醫(yī)用垃圾處理,污染的臺面、器具應嚴格消毒處理。真空采血管采血順序優(yōu)先采嗜氧血液培養(yǎng)瓶,其次采厭氧血液培養(yǎng)瓶血液生化管(紅帽,無抗凝劑)凝血試驗管(藍帽,檸檬酸鈉1:9抗凝)血粘度管(綠帽,肝素鈉抗凝)血3、沉管(黑帽,檸檬酸鈉1:4抗凝)血常規(guī)管(紫帽,EDTAK2抗凝)。樣本采集與標示1、確認患者身份:在樣本采集前必須確認患者身份與申請單一致,囑咐患者做好采集樣本前的準備工作,并告知相關注意事項。2、樣本容器選擇:按規(guī)定選用適合的容器。采集抗凝血樣時,應選擇合適的抗凝劑,抗凝劑與血液的量務必準確。3、樣本標示:樣本容器上須清楚標示與患者信息、檢測目的一致條形碼。4、樣本采集:采集靜脈血時,要正確使用真空采血管取血至刻度,在取下采血管的同時,立即將含抗凝劑的采血管輕輕顛倒混勻5-8次,不可劇烈搖晃以免造成樣本溶血。5、復核樣本:樣本采集后,應再次核對條形碼上的患者信息、檢驗目的與患者和樣本管是否4、一致。6、樣本放置:已采集的樣本,若不能及時送檢,要嚴格按檢驗規(guī)定的儲存條件暫存。未按要求采集、儲存、運送的樣本將被視為不合格樣本處理。樣本采集注意事項1、正確的采集樣本是保證檢驗質量的基礎:1.1避免干擾物的污染,特別是定量分析樣本。1.2樣本采集部位和方法要正確。1.3樣本標示清晰無誤。1.4無人為的溶血和渾濁因素:如采集樣本時抽血困難、收集樣本時用力震蕩等會造成溶血;餐后采血會出現(xiàn)脂血導致血清、血漿渾濁。1.5合理使用抗凝劑及防腐劑。1.6微生物檢驗樣本采集應嚴格無菌概念。1.7樣本采集后要盡快送至實驗室。2、樣本采集時間:2.1空腹樣本:一般指空腹8小時以后采集的樣本。清晨空腹血液樣本5、常用于臨床生化定量測定,受食物、體力活動、生理活動等的影響較少,易于發(fā)現(xiàn)和觀察病理情況,而且重復性較好。2.2隨時或急診樣本:指無時間限制或無法規(guī)定時間而必須采集的樣本,患者一般無法進行準備。隨時或急診樣本主要用于體內代謝比較穩(wěn)定以及受體內因素干擾少的物質的檢查,或者急診、搶救患者必須做的檢查。2.3指定時間樣本:即指定采集時間的樣本。根據不同的要求,有不同的指定時間。如24小時尿蛋白定量、葡萄糖耐量試驗等。檢驗科樣本拒收規(guī)定1、樣本屬性不清、標記錯誤或無標記。2、抗凝劑比例錯誤、抗凝血未及時混勻導致凝塊產生。3、樣本收集管使用錯誤。4、儲存、運送不當。5、痰、糞便樣本已干。6、尿培養(yǎng)樣本未使6、用無菌管留取。7、厭氧培養(yǎng)樣本未按要求取材、送檢。8、其他無菌部位取材及送檢時已被污染的樣本。樣本采集方法血液檢驗樣本采集方法血液檢驗樣本分為全血、血漿、血清等。全血樣本主要用于臨床血液學檢查,例如血細胞計數(shù)和分類、形態(tài)學檢查等;血漿樣本適合內分泌激素、血栓和止血檢查;血清樣本多適合臨床化學和免疫學的檢測。 按照血樣本采集部位的不同,分為靜脈血、動脈血和毛細血管血三種。絕大多數(shù)檢查采用靜脈血,少數(shù)檢查如血氣分析、乳酸和丙酮酸測定等需要采集動脈血,毛細血管血主要用于各種微量法檢查或大規(guī)模普查。靜脈血是最常用的實驗室檢查樣本,真空采血法是最好的靜脈血采集技術。基本原理是將雙向針的一端在持針器的幫助7、下刺入靜脈,有回血后將另一端插入真空試管內,血液在負壓作用下自動流入試管內。由于在完全封閉的狀態(tài)下采血,避免了血液外溢引起的污染,并有利于樣本的轉運和保存。標準真空采血管采用國際通用的頭蓋和標簽顏色顯示采血管內添加劑種類和檢測用途,可根據需要選擇相應的盛血試管。靜脈血采集方法、注意事項和采集樣品所用材料的安全處置:靜脈血采集方法及注意事項:1.止血帶或壓脈器:采集靜脈血時,止血帶壓迫靜脈時間不宜過長,以不超過2分鐘為宜,否則容易引起淤血、靜脈擴張,并且影響某些指標的檢查結果,如乳酸升高、PH值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。2.采血時間與部位:大多數(shù)化驗檢查要求清晨、空腹,采集靜脈血應盡8、可能避免在輸液同時取血,輸液不僅使血液稀釋,而且對實驗室檢查結果發(fā)生嚴重干擾,特別是血糖和電解質。如果因病情需要,輸液患者的靜脈血采集應在未輸液側肢體采集。任何情況下,都不能在留置管中采集血樣。3.避免溶血、雜質污染:采血器具必須無菌、干燥、潔凈。避免特別用力抽吸和推注、避免化學污染和細菌污染、避免因劇烈震蕩引起的溶血。因為紅細胞的某些成分與血清(漿)不同,樣本溶血可使紅細胞某些成分釋放,影響實驗室檢查結果。4.血樣的采集:血樣要求在每一天的同一時間采集,理想時間時早晨7:00到8:00,尤其是監(jiān)測為目的時,更要保證樣本采集時間的統(tǒng)一。最后一次食物和液體攝入應在前一天下午6:00到7:00(急9、診檢查例外)。血樣采集應在不服藥期間,如在早晨服藥前。血樣采集時,患者應仰臥位,采血點應在同一靜脈區(qū),通常為手臂靜脈。5.樣本采集后須立即送檢,放置過久影響檢驗結果。當取血不順利時,切忌在同一處反復穿刺,易導致樣本溶血或有小凝塊,影響檢測結果。6.采集血培養(yǎng)樣本時,如果用注射器采血,應將血液先注射厭氧瓶,盡量減少接觸空氣時間。如果是用負壓采血瓶,應先用嗜氧瓶采血,再用厭氧瓶采血。采集樣品所用材料的安全處置:使用后的采血針、注射器針頭等銳器物應當直接放入不能刺穿的利器盒內或毀型器內進行安全處置,禁止對使用后的一次性針頭復帽,禁止用手直接接觸使用過的針頭、刀片等銳器物;注射器針筒、棉簽等其他醫(yī)療廢10、物放入黃色醫(yī)療廢物袋中,醫(yī)療廢物和生活垃圾分類收集存放。消毒毀形后的醫(yī)療廢物必須交給指定的醫(yī)療廢物處理廠,不得擅自廢棄。一、臨床化學、免疫檢驗樣本臨床化學/免疫檢驗多用于非抗凝血樣本,最好使用真空負壓采血管。樣本采集主要注意事項有:1、 化學項目大多數(shù)需要空腹采靜脈血,多個單項化學檢測項目組合檢驗時一般可采1管血:2、 采血量視檢查項目多少不同而異,通常為4.0-5.0ml;3、 多個組合檢測項目同時采血時應按下列順序采血:血培養(yǎng)無添加劑管有添加劑管有添加劑管的順序為:枸櫞酸鹽管(如凝血四項、血沉等)肝素管(如血流變)EDTA管(如血常規(guī))草酸鹽/氟化鈉管4、不論是抗凝血還是非抗凝血,為了縮短11、血清或血漿與紅細胞的接觸時間,血液樣本收集后,須盡可能早的將血清或血漿從全血中分離出來,避免由此而影響檢驗結果的準確性。從血液樣本采集開始,必須在2h內將全血處理為血清或血漿。1)血清(非抗凝血):采血后樣本于22-25(室溫)15-30min后可自行(自發(fā))完全凝固禁用木棍和玻璃等玻璃凝塊:冷藏樣本凝集較慢,加促凝劑者凝集加快。2)血漿(抗凝血):應采用抗凝管采血,采血后立即顛倒混合5-10次,采血后數(shù)分鐘內可離心分離血漿。3)冷藏樣本:用于穩(wěn)定血液中溫度依賴性成分(抑制細胞代謝)的檢測項目,樣本于2-8冷藏(樣本采集后立即置于冰箱中,冷藏必須充分);樣本需冷藏的測定項目有:兒茶酚胺、胃泌素12、甲旁素、PH/血氣、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血樣本一般不冷藏,血鉀測定樣本冷藏不得2h。全血樣本切記冷凍。4)代謝抑制劑和防腐劑的應用:用于抑制細胞代謝。血樣本中加入氟化鈉后,血細胞未分離情況下血樣本中GLU,22-25穩(wěn)定24h,2-8穩(wěn)定48h;氟化鈉不適用于新生兒及兒童的GLU測定(因兒童PCV高,細胞糖酵解難以控制);氟化鈉-麝香草酚混合劑不適合酶學檢測(因氟化鈉-麝香草酚混合劑抑制酶活性);甲醛草酸鉀抗凝保存劑不適應于血糖測定。二、紅細胞沉降率(血沉,ESR)檢測樣本靜脈采集枸櫞酸鈉抗凝血,黑帽管采血注意事項:1、 單獨采1管血,準確采血至兩個刻度線之間(抗凝劑:全血=1:4)213、 采血后立即上下顛倒混合5-10次3、 采血后應盡快送檢(必須2h內檢測)三、血常規(guī)(全血細胞分析)檢驗樣本一般用EDTA1.5-2.2mg/ml抗凝,紫帽管采血注意事項:1、 采血后立即上下顛倒混勻,5-10次,不可用力震蕩:2、 應按抗凝管刻度采血至2ml,可不用空腹;3、 采血后應盡快送檢(需顯微鏡觀察形態(tài)的樣本采血后應及時推片固定,因為超過2小時時WBC形態(tài)會發(fā)生改變);4、 血型、網織紅細胞計數(shù)與血常規(guī)可采1管血。四、75克葡萄糖耐量試驗(OGTT)/胰島素釋放試驗、C-肽釋放試驗1、 病人準備:試驗前3日,每日進食碳水化合物量不低于250-300克,且維持正常活動,影響實驗的藥物14、(如:咖啡因、口服避孕藥、水楊酸鹽等)應在3日前停用,試驗前病人應10-16小時不進食。2、 標本采集:臨床上常用方法是清晨抽空腹血后,口服75克葡萄糖,再于給糖后1、2、3小時各采血2ml/1次(共4次)。3、 標本保存:采血后1小時內分離血清并及時冷藏送檢。4、 注意事項:胰島素測定受溶血影響較大,采血時應避免溶血。尿液常規(guī)檢驗采集尿標本種類按檢查目的,常可用下列標本:1、 晨尿:最好,安靜狀態(tài)下留取清晨第一次尿,該標本為濃縮尿。其細胞、管型等形態(tài)完整,適合做各種有型成分的檢查和尿蛋白、尿糖等項目的測定。2、 隨機尿:較常用,適用于門診和急診人常規(guī)檢驗。結果易受多種因素影響。3、 空腹或餐15、后尿:適用于糖尿病、尿膽原、尿蛋白等的檢查。4、 24h尿:用于尿液成分定量檢查分析,需準確量取24小時混合尿液的量。1)24h尿采集方法:留尿當日早晨8時排空尿液,之后每次排尿均收集與一大容器內。至次日早晨8時最后一次尿液共24小時之間的所有尿液全部收集與潔凈容器內。在收集期內每次尿液標本均應放冰箱(2-8)或陰涼處保存。全部收集完畢測量并記錄24h總尿量,混勻后取20-30毫升置于有蓋容器內送檢即可。2)24h尿可用于檢測Cr、Bun、K、Na、CL、Ca、蛋白、UA、P等。5、特殊實驗尿(如3h、8h、12h等計時尿和餐后尿等),則應按醫(yī)囑要求進行留尿,并注明用藥時間,便于分析對比。6、16、清潔尿(中段尿、導管尿、膀胱穿刺尿):用于病原微生物培養(yǎng)、鑒定和藥敏。、尿液標本收集容器要求1、 清潔、干燥、有蓋、便于標記和轉送、一次性使用,有較大開口便于收集;2、 避免陰道分泌物、精液、糞便等污染,還應注意避免煙灰、紙屑等異物混入;3、 無干擾化學物質(如表面活性劑、消毒劑)混入,不可使用未經洗滌的裝藥物或試劑的器皿收集標本;4、 能收集足夠尿液,最好大于50ml,如收集定時尿,容器應足夠大,并加蓋,必要時加防腐劑;5、 如需培養(yǎng)應在無菌條件下,用無菌容器收集中段尿液。尿液采集方法尿液常規(guī)檢查標本應按照以下原則進行采集:1、 尿液檢驗最好留取新鮮標本及時檢查,否則尿液生長細菌,使其中的化17、學成分發(fā)生變化。新鮮晨尿最佳,以清晨第一次尿為宜,較濃縮,條件恒定,便于對比。門、急診患者亦可隨即留取。在留取24h小時或12h尿液時,尿液標本最好至冰箱保存,也可根據檢測目的加入防腐劑。2、 尿標本的采集方法多采用自然排尿法,需要注意避免陰道分泌物、精液、糞便等污染;對自然排尿困難或需細菌培養(yǎng)者,可在無菌操作下用導尿法或膀胱穿刺法采集。3、 尿中某些化學物質及有形成分不穩(wěn)定,一經排出后易發(fā)生物理、化學變化;而原尿中原有或污染的細菌生長也可導致成分改變,如葡萄糖被分解。因此,采集的尿應加蓋后就盡快送檢,在采集后2h內完成有關檢查。4、 如不能及時送檢或收集較長時段尿樣,可采取化學防腐(不能用于18、微生物檢查)、冷藏等保存措施;尿液標本冰箱可保存6-8h,但細胞等有形成分會有破壞,會有結晶析出。5、 根據不同檢測目的選擇不同的防腐劑:臨床最多的尿液防腐劑為:1) 甲醛,用于尿液有形成分檢查,濃度為400mg/L尿液,即40%;2) 甲苯,常用于尿糖和尿蛋白等化學成分的定性或定量檢查,5-20ml/L尿液;3) 濃鹽酸,用于定量測定尿醛固酮、兒茶酚胺等,濃度為1ml/L尿液。6、 沉渣檢查:清晨空腹第一次尿,應在1h內送檢。標本置于干燥、潔凈的容器尿杯中,至少10ml。一般情況下,由患者自己采集中段尿。女性患者應清洗外陰部后留取。7、 特殊實驗外,晨尿或隨機尿要留取中段尿送檢,女性在經期不19、宜做尿液檢查。尿液采集注意事項1、 尿液標本必須新鮮,并按要求留取。從排出到檢測應在2h內完成,否則會影響尿化學成分及有形物質的改變。如不能及時分析,應置4下冷藏保存,但冷藏時間最長不得超過8h。有時冷藏后一些結晶析出會影響結果,因此從冰箱取出的尿標本應在室溫中放置一定時間,使尿標本溫度平衡到溫室后再進行混勻,然后取樣檢測。尿標本不能冰凍,否則會影響某些成分的檢測。如無特殊要求,均應采集清晨起床的第一次尿,即晨尿檢查。對于門診和急診的患者,可采集隨即尿,易受食物、體位、活動等的影響。2、 標本留取后應及時送檢,以免細菌繁殖、細胞溶解或被污染等。送檢標本時要置于有蓋容器內,以免尿液蒸發(fā)影響檢測結20、果。3、 常規(guī)檢驗留取中段尿送送檢。細菌檢驗尿標本留取方法見后述。4、 特殊檢驗項目標本留取請隨時與檢驗科聯(lián)系。5、 尿總蛋白測定注意避免血紅蛋白的污染,否則會使尿總蛋白假性升高;尿液中如含有免疫球蛋白鏈會使蛋白假性降低;應用多肽類藥物治療的病人,血液中的多肽會排泄入尿,可導致尿蛋白假性升高,如懷疑尿中有成分,建議將尿液濃縮后作蛋白電泳。糞便常規(guī)檢驗標本采集糞便常規(guī)檢查標本采集方法及注意事項1、 采集糞便標本的方法因檢查目的不同而有差別,一般檢驗留取新鮮的自然排出的糞便3-5g,必要時可肛拭子采取,放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內,貼好標識送檢。標本容器最好用內層涂蠟的硬紙盒便于檢查后焚毀21、。細菌檢查的糞便標本應收集于滅菌封口的容器內,勿混入消毒劑及其他化學藥品。2、 盛糞便標本的容器必須有蓋,有明顯標識。要選取糞便的膿、血、黏液等異常成分進行檢查,表面無異常時應從糞便表面、深處及糞便多處取材;采取標本后及時送檢否則可因PH及消化酶等影響,而使糞便中細胞成分破壞分解。3、 不應留取尿壺或便盆中的糞便標本。若標本中混入尿液,可導致某些項目檢測結果出現(xiàn)錯誤。糞便標本中也不可混入植物、泥土、污水等異物,易混淆實驗結果。不應該從衛(wèi)生褲或衣褲、紙尿褲等物品上留取標本,不能用棉簽有棉絮端挑取標本。4、 做大便隱血試驗時,應囑患者于檢查前3d內禁食肉類、含動物血的食物、某些蔬菜,禁服鐵劑和維生22、素C等對實驗有干擾作用的藥物。選取外表及內層糞便收集于合格容器內及時送檢,長時間放置可使反應的敏感度降低。5、 檢驗蟯蟲卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前,于肛門周圍皺襞處拭取標本,并立即送檢。6、 檢查血吸蟲卵時應取黏液、膿、血部分,如須孵化毛蚴應留取不少于30g的糞便,并盡快送檢,必要時留取整份糞便送檢。7、 檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體時,應床邊留取新排出的糞便,從膿血和稀軟部分取材,并立即保溫送實驗室,并且實驗室接收標本后應立即進行檢查。8、 細菌檢查用標本應全部用無菌操作收集于滅菌封口的容器內。特殊檢驗項目留取標本時請預先聯(lián)系。漿膜腔積液檢驗標本采集漿膜腔積液檢查標本1、 漿膜腔積23、液標本一般由臨床醫(yī)生行無菌穿刺術采集標本。2、 送檢標本量:理學檢查、化學檢查、細胞學檢查各留取2ml;細菌學檢查用無菌管采集標本,厭氧菌培養(yǎng)留取1ml,結核菌檢查留取10ml。3、 標本采集后必須立即送檢(否則可出現(xiàn)細胞變性,標本凝集,細菌溶解)。4、 用于細胞學檢查時,可在標本中加適量的EDTA-2K鹽抗凝。但還需留取1管不加抗凝劑的標本用于觀察積液的凝固性;化學檢查標本宜用肝素抗凝。腦脊液標本采集1、 由臨床醫(yī)師行腰椎穿刺術采集標本。2、 采集后的腦脊液分別收集于3個無菌試管中,每管 1-2ml,第一管做細菌培養(yǎng),第二管做化學分析和免疫學檢查,第三管做一般性狀及顯微鏡檢查(腦脊液常規(guī))。24、3、 標本必須立即送檢,放置過久影響結果,如細胞破壞、變性或細胞包裹于纖維蛋白凝塊中,使細胞計數(shù)降低,分類不準確等;存放的腦脊液葡萄糖會分解,使檢測結果降低。胸、腹水標本采集1、有臨床醫(yī)師行無菌穿刺術,最好留取中段液體于消毒容器內,立即送檢。2.為防止出現(xiàn)凝塊、細胞變性、細菌破壞自溶等,標本中應加入抗凝劑。常規(guī)及細胞學檢查宜用EDTA-2K抗凝,生化檢查標本宜用肝素抗凝。3、胸、腹水常規(guī)檢測需采集兩管各10ml,一管抗凝,另一管不抗凝。關節(jié)腔穿刺液標本采集后第1管作微生物及一般性狀檢查,第2管用肝素抗凝作細胞學及化學檢查。前列腺和精液檢查前列腺液標本應由臨床醫(yī)師進行前列腺按摩術采集,可直接滴在25、玻片上;若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液。疑為前列腺結核、膿腫或腫瘤的患者禁忌前列腺按摩。一次按摩失敗或檢查結果陰性,而明確有臨床指征者,可隔35天后重新復查。精液采集最好在實驗室附近,室溫應控制在20-35,采集標本前禁欲3-7天,采集精液前排凈尿液。可用手淫法或其他方法,將一次射出的全部精液直接排入潔凈、干燥的容器內。因精子生成日間變動較大,不能僅憑一次檢查結果做診斷。一般應間隔1-2周檢查一次,連續(xù)檢查2-3次。細菌培養(yǎng)之腦脊液、胸腹水穿刺液、關節(jié)腔穿刺液標本采集1、 應在用藥前采集,由臨床醫(yī)生以無菌條件下進行腰椎穿刺采集腦脊液3-5ml,因腦膜炎球菌易自溶,流感嗜血桿菌也易死亡,26、故盛于無菌試管或小瓶中保溫立即送檢。或將腦脊液5ml直接注射于血培養(yǎng)兒童瓶中送檢即可。2、 穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關節(jié)液及鞘膜液。一般由臨床醫(yī)生穿刺抽取。標本的采集應在患者用藥之前,或停藥1-2天后進行。胸水、腹水可抽取5-10ml,心包液、關節(jié)可抽取2-5ml,將所得穿刺液分盛于含有和不含有抗凝劑的無菌試管或小瓶中,充分混勻后,立即送檢。微生物檢驗標本采集微生物學檢驗標本的正確采集、運送及處理,與細菌的培養(yǎng)、鑒定結果有十分密切的關系;對可疑烈性呼吸道傳染病患者采集標本時,必須按國家規(guī)范化要求嚴格注意生物安全;醫(yī)生、護士、檢驗人員均應重視微生物檢驗標本正確采集的有關問題,并有責任向患者27、及其家屬進行正確采集標本的宣傳和指導。微生物學檢驗標本采集、運送、驗收和處理事項1、 標本采集1) 申請單標記必須清楚(姓名、性別、年齡、病歷號、臨床診斷、標本來源、采集時間、檢查項目、抗生素應用情況等),以便實驗室能夠合理選擇培養(yǎng)環(huán)境和培養(yǎng)基;2) 盡量在抗生素應用前采集標本,以提高陽性檢出率和避免漏檢;3) 標本采集應嚴格執(zhí)行無菌操作;4) 咽拭、肛拭、傷口拭子等拭子標本,應插入運送培養(yǎng)基送檢;5) 痰、尿液、傷口拭子等混有正常菌群的標本,不可放入肉湯培養(yǎng)基內送檢;6) 采集標本的容器必須經滅菌處理,但不可用消毒劑。2、 標本運送1) 標本采集后應盡快送到微生物實驗室;2) 標本采集后在室28、溫下超過2h未送達實驗室,可視為不合格樣本。3、 注意事項1) 微生物檢驗樣本必須按要求采集轉運,否則將影響檢查結果,并給評價其意義帶來麻煩甚至誤導。2) 微生物樣本極易被污染,污染的樣本雜菌大量繁殖抑制病原菌生長,條件致病菌也是致病菌,如污染條件致病菌將誤導臨床,造成對患者的損害以及經濟和時間的浪費。3) 某些標本離體極易死亡,應在床邊采取和接種或立即保溫送至實驗室檢驗。室溫放置或延遲送檢,可使檢出的陽性率降低;不能使用冷藏的樣本檢驗。微生物檢驗標本采集和處理1、 尿液標本采集和處理通常留取晨起第一次尿液;尿液采集后要及時送檢,并保證2h內接種;不能及時送檢和接種時,尿液應置4-8冰箱保存;29、冷藏標本應于8h內接種;淋球菌培養(yǎng)的標本不能冷藏。懷疑沙門氏菌感染時,應于發(fā)病2w左右采集尿液,懷疑鉤端螺旋體感染時,應于發(fā)病后2w采集尿液,上述時間此時陽性率高。尿液微生物學檢驗標本采集方法如下:1) 中段尿采集法:成年男性和女性分別用肥皂水或1:1000高錳酸鉀水溶液清洗尿道口和外陰部,再用滅菌水沖洗尿道口,無菌生理鹽水沖去消毒液,然后排尿棄去前段尿液,收集中段尿5-10ml盛于帶蓋的無菌容器內送檢。2) 導尿法:用導尿管導取10-15ml尿液,置滅菌容器內送檢;長期留置導尿管者應更換新導尿管留尿;留置導尿時,用無菌消毒法消毒導尿管外部及導尿管口,用無菌注射器通過導尿管抽取尿液送檢。3) 30、集尿法:懷疑結核分枝桿菌感染時,于清潔容器內留取24h尿液,取其沉渣10-15ml送檢。4) 恥骨上膀胱穿刺法:培養(yǎng)結果與臨床病情矛盾時可采取此法,一般較少用。5) 腎盂尿采集法:必須由臨床醫(yī)生采集注意事項:正常人的尿液是無菌的,除外尿道有正常菌群外,還有條件致病菌,而這些細菌又是尿路感染中常見的致病菌,故應該注意無菌采集。2、 糞便標本采集和處理1) 采集時間 腹瀉患者于急性期,盡量在用藥前采集糞便; 傷寒患者于發(fā)病2w以后采集糞便 懷疑霍亂時立即采集糞便送檢。2) 采集方法: 自然排便法:取新鮮糞便的黏液、膿血、或絮狀物等有意義成分,23g或12ml,盛無菌容器內或置于保存液或增菌液內送檢31、;若疑似霍亂者應置于堿性蛋白胨水中(ph8.6)。 直腸拭子法:難以獲得糞便或排便困難患者及幼兒可采用此法,將拭子前端用無菌甘油或生理鹽水濕潤,然后插入肛門約(幼兒),輕輕在直腸內旋轉。擦取直腸表面黏液后取出,盛于無菌試管中或保存液中送檢。、痰及下呼吸道標本采集和處理1)自然咳痰法:晨痰為佳;先冷開水洗漱、清潔、口腔和牙齒;再用力咳出呼吸道深部的痰,吐至無菌容器內;痰量不得少于1ml;痰咳出困難時可先霧化吸入NaCl溶液使痰容易咳出。查結核分枝桿菌,應留取24小時痰。2)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將拭子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上即可送檢。3)支氣管32、鏡、支氣管穿刺、支氣管肺胞灌洗等采集法,此采集法必須由醫(yī)生操作。氣管導管法:氣管插管吸取下呼吸道痰液。氣管鏡采集法:用氣管鏡在肺內病灶附近用導管吸取或用支氣管刷直接取得。4)呼吸道標本采集方法:鼻咽拭子法,先用清水漱口,對光做,頭向上仰,口張大,用壓舌板輕壓舌根,用棉拭子在病人咽后壁,懸雍垂后側涂抹數(shù)次,立即放入無菌試管中。注意事項:痰經過口腔,所以患者應用清水漱口數(shù)次,盡量排除口腔內的大量雜菌。痰液標本要求涂片鏡檢,達到低倍鏡視野中10個鱗狀上皮細胞,以及25個白細胞方可送檢。4、血液及骨髓培養(yǎng)標本1)血培養(yǎng)標本采集指征:對入院的危重患者未進行系統(tǒng)性抗生素治療前,應及時進行血培養(yǎng),患者出現(xiàn)以33、下體征可作為血培養(yǎng)的重要指征: 發(fā)熱(38)或低熱(36) 寒熱 白細胞增多(10x109/L,特別是在有“核左移”未成熟的或帶狀的白細胞增多時) 粒細胞減少(成熟的多核白細胞1x109/L 血細胞減少 皮膚黏膜出血 昏迷 多器官衰竭2)最常用的方法為血液增菌培養(yǎng)法。培養(yǎng)瓶分為需氧瓶和厭氧瓶兩種。每瓶需要8-10ml血液。兒童瓶為需氧瓶每瓶需血液1-3ml,另外,腦脊液和胸腹水也可用血液增菌培養(yǎng)瓶,但僅需要兒童瓶,標本量與血液相同。A.抗生素治療前,嚴格無菌靜脈采血8-10ml(兒童1-4ml);不同時間或不同部位采取2-3份血液標本B.無菌注入專用培養(yǎng)瓶(成人、兒童、需氧瓶、厭氧瓶、L型菌需34、要不同培養(yǎng)瓶)中送檢C.如已用抗生素不能停用時,可于48h分別于下次用抗生素之前,采取不同時間的3份血液標本送檢D.必要時可需氧瓶,厭氧瓶(占10)和L型菌同時培養(yǎng)E.疑為心內膜炎時,為提高陽性檢出率,可酌情不同部位、不同時間,多次采血或動脈采血進行培養(yǎng)F.必要時可取骨髓1-2ml,無菌注入專用培養(yǎng)瓶中送檢。注意事項:血液在正常情況下為無菌標本,應嚴格按照無菌操作,避免雜菌污染。一般病人在發(fā)病初期1-2天或發(fā)熱高峰期時采集血液標本,用一次性注射器在肘靜脈采血,采血前局部皮膚應徹底消毒。對亞急性細菌性心內膜炎等病人,應從肘動脈或股動脈采血為宜。5、腦脊液1)采集時間:懷疑腦膜炎時應立即采集腦脊液35、,最好是在應用抗生素之前采集腦脊液。2)采集方法:無菌腰穿采集腦脊液3-5ml分裝到3個無菌小瓶中。用于細菌和病毒檢測時腦脊液量不少于1ml;用于真菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于2ml。6、穿刺液培養(yǎng)標本1)穿刺液培養(yǎng)標本包括胸水、腹水、心包液、關節(jié)液、鞘膜液等。2)采集時間:一般在用抗生素等抗菌藥物治療前,或在停止使用抗菌藥物之后2-3d采集標本。3)采集方法無菌操作穿刺抽取標本或外科手術采集標本;標本采集量應1ml(結核分枝桿菌培養(yǎng)時應為1-5ml)可在盛器中先加入滅菌肝素然后再加入穿刺液,以防止穿刺液凝固。7、胃液及膽汁培養(yǎng)標本抽取空腹胃液5ml,置無菌管內送檢;膽汁培養(yǎng)標本由十二指腸引36、流法或膽囊穿刺法或手術中留取膽汁,采集膽汁量為5ml,置無菌試管中送檢;胃液和膽汁采集后必須立即送檢。8、膿汁和病灶分泌物培養(yǎng)標本采集前局部消毒后無菌采取膿汁或病灶分泌物或組織。標本采集后立即置無菌管內送檢。9、眼、耳、口、鼻、咽拭子培養(yǎng)標本1) 采集眼分泌物:先用無菌生理鹽水沖洗眼部,然后用棉拭子拭干,再用無菌棉拭于采集分泌物2) 采集咽分泌物:先用清水漱口,用壓舌板將舌向下向外壓,將咽拭子在咽后壁或懸雍垂后側涂抹數(shù)次,切勿接觸口腔和舌粘膜。3) 采集耳、鼻或鼻咽分泌物:直接用拭子涂抹病灶部位,切勿接觸周圍粘膜或皮膚。標本采集過程中應注意避免粘膜上的正常菌群污染,標本采集后連同拭子一起置無菌37、管內送檢。10、泌尿生殖道培養(yǎng)標本1) 尿道分泌物:清洗尿道、采取尿道、溢出的膿性等分泌物,或用無菌拭子插入尿道2-4cm處輕輕轉動后取出,置無菌試管中送檢。2) 陰道、宮頸分泌物、通過陰道擴張器,用滅菌拭子采取陰道口或宮頸管1-2cm處分泌物,置無菌試管中送檢。避免陰道分泌物污染拭子。3) 宮腔分泌物:在必要時用外套保護膜的滅菌導管抽取。4) 前列腺液:清洗尿道、沖洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液于無菌容器內送檢。5) 精液:受檢者應5天未排精,清洗尿道后手淫或體外排精法,射精于無菌容器內送檢。6) 潰瘍分泌物:滅菌生理鹽水溶液清洗患處,用無菌拭子取其邊緣或基底部的分泌物,置無菌試管中送檢38、。11、皮膚(主要指傷口、創(chuàng)面膿液等)標本采集方法1) 對采集標本部位應首先清除污垢,再以碘酒或酒精消毒,防止皮膚表面污染菌混入影響結果,盛放標本器皿應無菌。2) 封閉性膿腫:病灶局部消毒后,以無菌干燥注射器穿刺抽取。將采集的膿液注入滅菌試管。對疑似厭氧菌的膿液,抽取膿液后立即排出注射器內的空氣,同時將針頭插入滅菌橡皮塞,防止空氣進入。3) 開放性膿腫及膿性分泌物:先做局部消毒再用無菌棉拭子采取膿液及病灶深部分泌物,并置無菌容器內送檢。4) 大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物因創(chuàng)面的部位不同,細菌種類不同,故應用棉拭子多部位采集膿液及分泌物,置于無菌試管。注意事項:燒傷12小時內的創(chuàng)面及分泌物中細菌檢出率39、較低。12、空氣培養(yǎng)標本采集方法1) 采樣時間:選擇消毒處理后與進行醫(yī)療活動之前采樣。2) 采樣高度:與地面垂直高度80-150cm。3) 布點方法:室內面積30,設一條對角線上取三點,即中心一點,兩端各距墻1m處取一點;室內面積30,設東西南北中5點,其中東南西北距墻1m。4) 采樣方法:用9直徑培養(yǎng)瓊脂平板在采樣點暴露5分鐘后送檢培養(yǎng)。5) 標本保存 采樣后必須盡快送檢。 在平皿上注明各采自哪個室及布點的位置,用膠布把平皿和平皿蓋子固定好以免在送檢途中平皿和平皿蓋子分離而造成污染。13、樣本運送流程1、常規(guī)樣本運送流程:檢驗科衛(wèi)生員08:10分開始到各臨床病區(qū)收集血樣、尿/糞樣等常規(guī)樣本,現(xiàn)場登記樣本類別、患者姓名、樣本數(shù)量,不合格樣本填寫拒收單并由病區(qū)護士簽字確認。衛(wèi)生員將各病區(qū)樣本收集完成后,送達檢驗科門診化驗室。2、急診樣本運送程序:各病區(qū)的急診樣本由病區(qū)護士/護工送至檢驗科門診化驗室,由檢驗科接收人員負責登記“急診樣本接收記錄表”,送檢人員簽字確認。護理部院感辦 2013年聯(lián)合發(fā)布 檢驗科
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