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1、 微生物實驗室安全管理制度及規(guī)程編 制： 審 核： 批 準(zhǔn)： 版 本 號: ESZAQDGF001 編 制： 審 核： 批 準(zhǔn)： 版 本 號: 微生物實驗室安全管理制度一、實驗室生物安全規(guī)程（一）進(jìn)入規(guī)定1、在處理危險度2級或更高危險度級別的微生物的實驗室門上應(yīng)標(biāo)有國際通用的生物危害警告標(biāo)志。2、只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可進(jìn)入實驗室工作區(qū)域。3、實驗室的門應(yīng)保持關(guān)閉。4、兒童不應(yīng)被批準(zhǔn)或允許進(jìn)入實驗室工作區(qū)域。（二）操作規(guī)范1、嚴(yán)禁用口吸移液管。2、嚴(yán)禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。3、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進(jìn)行。4、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時，2、必須向?qū)嶒炇野踩鞴軋蟾妗?、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。（三）人員防護(hù)1、在實驗室工作時，任何時候都必須穿著工作服。2、在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的操作時，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完摘除后必須洗手。3、在處理完感染性實驗材料和動物后，以及在離開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手。4、有噴濺的可能時，為了防止眼睛或面部受到潑濺物的傷害，應(yīng)戴安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護(hù)設(shè)備。5、不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。6、禁止在實驗室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。7、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。8、在實驗3、室內(nèi)用過的防護(hù)服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。（四）實驗室工作區(qū)1、實驗室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實驗無關(guān)的物品。2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后，都必須清除工作臺面的污染。3、所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須清除污染。4、在進(jìn)行包裝和運輸時必須遵循國家和或國際的相關(guān)規(guī)定。5、如果窗戶可以打開，則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動物進(jìn)入的紗窗。（五）實驗室生物安全預(yù)防技術(shù)實驗室中標(biāo)本的安全操作實驗室標(biāo)本的收集、運輸和處理不當(dāng)，會帶來使相關(guān)人員感染的危險。1、標(biāo)本容器標(biāo)本容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品。標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)堅固，正確地用蓋子或塞子蓋好后應(yīng)無泄漏。在4、容器外部不能有殘留物。容器上應(yīng)當(dāng)正確地粘貼標(biāo)簽以便于識別。標(biāo)本的要求或說明書不能夠卷在容器外面，而是要分開放置，最好放置在防水的袋子里。2、標(biāo)本接收設(shè)有接收大量標(biāo)本的專門的房間或空間。3、打開包裝接收和打開標(biāo)本的人員應(yīng)當(dāng)了解標(biāo)本對身體健康的潛在危害，并接受過如何采用標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法的培訓(xùn)。標(biāo)本的內(nèi)層容器要在生物安全柜內(nèi)打開，并準(zhǔn)備好消毒劑。避免感染性物質(zhì)的擴(kuò)散1、為了避免被接種物灑落，微生物接種環(huán)的直徑應(yīng)為23mm并完全封閉，柄的長度應(yīng)小于6cm以減小抖動。2、準(zhǔn)備高壓滅菌和或?qū)⒈惶幚淼膹U棄標(biāo)本和培養(yǎng)物應(yīng)當(dāng)放置在防漏的容器內(nèi)（如實驗室廢棄物袋）。3、在每一階段工作結(jié)束后，必須采用適當(dāng)?shù)南緞┣宄?、作區(qū)的污染。避免感染性物質(zhì)的食入以及與皮膚和眼睛的接觸1、微生物操作中釋放的較大粒子和液滴（直徑大于5m）會迅速沉降到工作臺面和操作者的手上。實驗室人員在操作時應(yīng)戴一次性手套，并避免觸摸口、眼及面部。2、不能在實驗室內(nèi)飲食和儲存食品。3、在實驗室里時，嘴里不應(yīng)有東西鋼筆、鉛筆、口香糖。4、不應(yīng)在實驗室化妝。5、在所有可能產(chǎn)生潛在感染性物質(zhì)噴濺的操作過程中，操作人員應(yīng)將面部、口和眼遮住或采取其他防護(hù)措施。避免感染性物質(zhì)的注入1、通過認(rèn)真練習(xí)和仔細(xì)操作，可以避免破損玻璃器皿的刺傷所引起的接種感染。應(yīng)盡可能用塑料制品代替玻璃制品。2、銳器損傷（如通過皮下注射針頭、巴斯德玻璃吸管以及破碎的玻璃）可能引6、起意外注入感染性物質(zhì)。3、以下兩點可以減少針刺損傷：（a）減少使用注射器和針頭（可用一些簡單的工具來打開瓶塞，然后使用吸管取樣而不用注射器和針頭）；（b）在必須使用注射器和針頭時，采用銳器。4、不要重新給用過的注射器針頭戴護(hù)套。一次性物品應(yīng)丟棄在防耐穿透的帶蓋容器中。5、應(yīng)當(dāng)用巴斯德塑料吸管代替玻璃吸管。二、實驗室設(shè)備處理生物安全危害時，使用安全設(shè)施并結(jié)合規(guī)范的操作將有助于降低危險。選擇設(shè)備時應(yīng)符合一些基本原則，即：1、在設(shè)計上應(yīng)能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸2、建筑材料應(yīng)防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求3、設(shè)備裝配后應(yīng)無毛刺、銳角以及易松動的部件4、設(shè)備的設(shè)計、建造與安裝應(yīng)便于操作、易于7、維護(hù)、清潔、清除污染和進(jìn)行質(zhì)量檢驗。應(yīng)盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。生物xx的使用1、參考國家標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)文獻(xiàn)，對所有可能的使用者都介紹生物安全柜的使用方法和局限性。發(fā)給工作人員書面的規(guī)章、安全手冊或操作手冊。特別需要明確的是，當(dāng)出現(xiàn)溢出破損或不良操作時，安全柜就不再能保護(hù)操作者。2、生物安全柜運行正常時才能使用。3、生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板。4、安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放置器材或標(biāo)本，不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)。5、安全柜內(nèi)不能使用本生燈，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器，但最好使用一次性無菌接種環(huán)。6、所有工作必須在工作臺面的中后部進(jìn)行，并8、能夠通過玻璃觀察擋板看到。7、盡量減少操作者身后的人員活動。8、操作者不應(yīng)反復(fù)移出和伸進(jìn)手臂以免干擾氣流。9、不要使實驗記錄本移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，因為這將干擾氣體流動，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。10、工作完成后以及每天下班前，使用消毒液對生物安全柜的表面進(jìn)行擦拭。11、在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，安全柜的風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運行5min。12、在生物安全柜內(nèi)操作時，不能進(jìn)行文字工作。離心機(jī)的使用1、在使用實驗室離心機(jī)時，儀器良好的機(jī)械性能是保障微生物安全的前提條件。2、按照操作手冊來操作離心機(jī)。3、離心機(jī)放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個子工作人員也能夠看到離心機(jī)內(nèi)部，以正確放置十字軸和離心桶9、。4、用于離心的試管和標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊（最好使用螺旋蓋）。5、離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。6、離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對，并在裝載離心管后正確平衡。7、空離心桶用蒸餾水或乙醇（異丙醇，70）來平衡。鹽溶液或次氯酸鹽溶液對金屬具有腐蝕作用，因此不能使用。8、當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時，必須小心不能將離心管裝得過滿，否則會導(dǎo)致漏液。9、每天檢查離心機(jī)內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯，應(yīng)重新評估離心操作規(guī)范。10、每天檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細(xì)微裂痕。11、每次使用后，要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機(jī)腔的污染。12、使用后將離心桶倒置存放使平衡液流干。移液10、管和移液輔助器的使用1、應(yīng)使用移液輔助器，嚴(yán)禁用口吸取。2、所有移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染。3、不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體。4、感染性物質(zhì)不能使用移液管反復(fù)吹吸混合。5、不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。6、刻度對應(yīng)（Mark-to-mark）移液管不需要排出最后一滴液體，因此最好使用這種移液管。7、污染的移液管應(yīng)該完全浸泡在盛有適當(dāng)消毒液的防碎容器中。移液管應(yīng)當(dāng)在消毒劑中浸泡適當(dāng)時間后再進(jìn)行處理。8、盛放廢棄移液管的容器不能放在外面，應(yīng)當(dāng)放在生物安全柜內(nèi)。9、有固定皮下注射針頭的注射器不能夠用于移液。10、在打開隔膜封口的瓶子時，應(yīng)使用可以使用移液管的工具，而避免使用皮下注射11、針頭和注射器。11、為了避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴(kuò)散，在工作臺面應(yīng)當(dāng)放置一塊浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙，使用后將其按感染性廢棄物處理。三、廢棄物處理廢棄物是指將要丟棄的所有物品。在實驗室內(nèi)，廢棄物最終的處理方式與其污染被清除的情況緊密相關(guān)。廢棄物處理的首要原則是所有感染性材料必須在實驗室內(nèi)清除污染、高壓滅菌或焚燒。1、銳器：皮下注射針頭用后不可再重復(fù)使用，包括不能從注射器上取下、回套針頭護(hù)套、截斷等，應(yīng)將其完整地置于專用一次性銳器盒中按醫(yī)院內(nèi)醫(yī)療廢物處置規(guī)程進(jìn)行處置。盛放銳器的一次性容器絕對不能丟棄于生活垃圾中。2、高壓滅菌后重復(fù)使用的污染（有潛在感染性）材料：任何高壓滅菌后重復(fù)使用12、的污染（有潛在感染性）材料不應(yīng)事先清洗，任何必要的清洗、修復(fù)必須在高壓滅菌或消毒后進(jìn)行。3、廢棄的污染（有潛在感染性）材料：除了銳器按上面的方法進(jìn)行處理以外，所有其他污染（有潛在感染性）材料在丟棄前均需消毒。消毒方法首選高壓蒸汽滅菌，其次為2000mg/l有效氯消毒液浸泡消毒。四、意外事故應(yīng)對方案和應(yīng)急程序（一）刺傷、切割傷或擦傷受傷人員應(yīng)當(dāng)脫下防護(hù)服，清洗雙手和受傷部位，使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑，必要時進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。潛在感染性物質(zhì)的食入應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服并進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。（二）潛在危13、害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，任何暴露人員都應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢。立即通知實驗室負(fù)責(zé)人和科室安全主管。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，1h內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)。如果實驗室沒有中央通風(fēng)系統(tǒng)，則24h內(nèi)嚴(yán)禁人員進(jìn)入實驗室。應(yīng)張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志。過了相應(yīng)時間后，在生物安全主管的指導(dǎo)下清除污染。應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備。（三）容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出立即用布或紙巾覆蓋受感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品。然后在上面倒上消毒劑，并使其作用適當(dāng)時間。然后將布、紙巾以及破碎物品清理掉；玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理。然后再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)14、當(dāng)對他們進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。用于清理的布、紙巾和抹布等應(yīng)當(dāng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。在所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。如果實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，將這些信息復(fù)制，并將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。（四）火災(zāi)和自然災(zāi)害事先告知消防人員和其他服務(wù)人員哪些房間有潛在的感染性物質(zhì)。要安排這些人員參觀實驗室，讓他們熟悉實驗室的布局和設(shè)備。發(fā)生自然災(zāi)害時，應(yīng)就實驗室建筑內(nèi)和或附近建筑物的潛在危險向當(dāng)?shù)鼗驀揖o急救助人員提出警告。只有在受過訓(xùn)練的實驗室工作人員的陪同下，他們才能進(jìn)入這些地區(qū)。感染性物質(zhì)應(yīng)收集在防漏的盒子內(nèi)或結(jié)實的一次性袋子中。由生物安全人員依據(jù)當(dāng)?shù)氐囊?guī)定決定繼續(xù)利用或是最終丟棄。參考文獻(xiàn)：1.實驗室生物安全手冊，第三版，世界衛(wèi)生組織.2.2004年中華人民共和國傳染病防治法（修訂版）3.2004年國務(wù)院病原微生物實驗室生物安全管理條例4.2004年衛(wèi)生部實驗室生物安全通用要求（第一版）5.2006年衛(wèi)生部醫(yī)院感染管理辦法