1、安捷倫高效液相色譜儀最新驗證方案Agilent1200高效液相色譜儀 驗證方案 類 別: 編 號: 部 門:驗證委員會 頁 碼: 共16頁，第1頁 版 次: , 新訂 , 替代: 起草部門: 年 月 日 審核: 年 月 日 審閱會簽: (驗證委員會) 批 準: 年 月 日 實施日期: 年 月 日 復印數: 批準: 分發至: 第 1 頁 共 17 頁 目 錄 1( 概述3 2( 驗證目的3 3( 驗證依據及驗證范圍3 4( 驗證工作小組3 5( 驗證方案審批3 5.1驗證方案起草3 5.2驗證方案會簽3 5.3驗證方案批準3 5.4驗證方案實施3 6(驗證的準備4 6.1文件資料的確認4 6.2

2、售后服務4 6.3關鍵性儀表及消耗性備品備件4 6.4安裝檢查4 6.5計算機的安裝情況檢查5 6.6安裝確認結論及批準5 7(安裝驗證內容 5 7.1評價設備性能、質量、適用性是否符合采購質量標準要求5 7.1.1評價儀器的安裝條件是否符合GMP及供應商提議的要求5 7.1.2起草標準操作規程5 7.1.3儀器校正5 7.2 運行確認(也即功能試驗)5 7.2.1 測試項目和認可標準5 7.2.2 驗證所需的材料5 7.2.2.1 玻璃儀器設備5 7.2.2.2 試劑、標準溶液5 7.2.2.3 其它輔助設備5 7.2.3 軟件系統安全性確認(必要時)5 7.2.4 運行確認的實施6 7.2

3、.5 運行確認評價及結論7 8.性能確認(適用性預試驗)7 9.擬訂再驗證項目及周期7 10.驗證結論 7 第 2 頁 共 17 頁 1.概述 高效液相色譜法系采用高壓輸液泵將規定的流動相泵入裝有填充劑的色譜柱，對供試品進行分離測定的色譜法。注入供試品，由流動相帶入柱內，各組分在柱內被分離，并依次進入檢測器，由積分儀或數據處理系統記錄和處理色譜信號，得到測定結果。由于應用了各種特性的微粒填料和加壓的液體流動相，本法具有分離性能高、分析速度快的特點。 高效液相色譜儀是根據質量控制的目的和要求，在調研的基礎上，公司于 年 月購置的精密儀器，其生產廠為 ，主要用于樣品的 分析測試。 由 組成。 應用

4、軟件為 ，版本號 。 2.驗證目的 按照 GMP 的要求，需要對該儀器進行安裝確認、運行確認、性能確認，以確定目前的實驗室環境能否滿足該儀器的正常操作和使用，儀器是否具有良好的檢測性能，能否滿足驗證可接受標準和我們日常分析測試工作的需要。 3. 驗證范圍及驗證依據 3.1本方案適用于對精密儀器室 高效液相色譜儀的驗證。 3.2本方案驗證依據 3.2.1 GB/T21187-2007 高效液相色譜儀檢定規程 3.2.2 高效液相色譜儀操作規程 4. 驗證工作小組 組 長 姓 名 職務/職稱 部門 成 員 5.驗證方案審批 5.1 驗證方案起草 起草部門 簽名 日 期 設備動力部 年 月 日 質管

5、部 年 月 日 5.2驗證方案會簽 部門 簽 名 日 期 質管部 年 月 日 設備動力部 年 月 日 5.3驗證方案批準 批 準 人 簽 名 日 期 質管部 年 月 日 5.4驗證方案實施 實施部門 職責 設備動力部 負責儀器的安裝確認。 第 3 頁 共 17 頁 質管部 負責儀器的運行確認、性能的確認。 6.驗證的準備 6.1 文件資料的確認 下列文件資料是否齊全，是否符合GMP要求 序號 文件/資料 編號 存放地 1 設備采購定單 2 原版操作說明書 安裝手冊和維修手冊(如必要) 3 儀器操作規程SOP 4 儀器使用、維修記錄 5 中華人民共和國國家計量檢定規程 JJG694-2007 6

6、 儀器檔案(如必要) 7 中國藥典(2010版)附錄 8 標準物質證書 9 驗證方案 結論: 檢查人 檢查日期 復核人 復核日期 6.2售后服務 維修單位: 聯系電話: 地址: 傳真: 聯系人: 檢查人 日期 6.3關鍵性儀表及消耗性備品備件:見附件2 檢查人 日期 6.4安裝檢查 對照使用說明書要求安裝，確認環境、電源等符合要求。 檢查內容 要求 方法 結果 室內不得存放與實驗無關的易燃、易爆和強腐環境 目測 蝕性的物質，無強烈的機械震動和電磁干擾。 15?,35? 環境溫度 溫濕度儀測 35%,75% 環境相對濕度 溫濕度儀測 儀器應平穩而牢固地安置在工作臺上 安裝位置 按要求安裝 220

7、V?22V 電壓 電壓儀測 50Hz?0.5Hz 頻率 接地良好 接地電阻表接地 測定 電源線 與插孔吻合 按要求安裝 氣體管路 氣體管路應適用。 按要求安裝 冷卻水 流量充足、穩定 目測 檢查人 日期 第 4 頁 共 17 頁 6.5計算機的安裝情況檢查 項 目 安裝的主要軟件 文件格式 安裝位置 數據文件保存位置 密碼復雜性 工作站安裝 6.6安裝確認結論及批準 結論:所有物品與檢查清單相符，實驗室電、氣設計安裝合理，實驗室環境良好，符合儀器安裝要求。氣、電及管路連接符合供貨方的要求。 儀器安裝 檢查人 日期 批準人 日期 7(安裝確認 .1評價設備性能 、質量、適用性是否符合采購質量標準

8、要求:見附件3。 77.1.1評價儀器的安裝是否符合GMP及供應商提議的要求 查閱設備采購定單、操作手冊等，列出設備安裝、使用所需條件，包括溫度、濕度、通風條件、電路等。檢查儀器安裝與使用所處的環境條件，是否符合上述要求。檢查結果記錄于附件4。 .1.2起草標準操作規程(可驗證后補充) 7標準操作規程 維護保養規程 校正規程 7.1.3儀器校正 由廠商技術人員現場安裝、調試，進行運行確認前的校正。 8.運行確認(功能試驗) 8.1 測試項目和認可標準 根據中華人民共和國國家計量檢定規程JJG694-2007、中國藥典(2010版)附錄確定。如無相關標準，參考儀器說明書確定。 8.2 驗證所需的

9、材料 8.2.1 玻璃儀器設備 計量玻璃儀器需徹底清洗并經檢定，一般玻璃儀器要保證潔凈。 8.2.2 試劑、標準溶液 a) 甲醇(色譜純);純化水(0.45nm微孔濾膜過濾) b) 丙酮(色譜純); c) 0.25mg/ml的甲硝唑對照品; d) 流動相:0.3%丙酮-水;甲醇:水(20:80)。 8.2.3儀器 a) 安捷倫1200高效液相色譜儀; b) 用于藥品預處理和衍生的各種玻璃儀器和設備。 8.3軟件系統安全性確認 打開計算機開關，待屏幕運行 Windows xp 操作系統以后，由可以授權操作該儀器的檢驗員設定登陸用戶名、密碼，重新啟動系統。再讓其他不知被授權人員登陸，嘗試輸入用戶名

10、和密碼，嘗試能否進入計算機系統，連續嘗試 5 次。不知用戶名和密碼的操作人，應無法登陸計算機系統。 第 5 頁 共 17 頁 結 論: 檢查人: 日期: 8.4 運行確認的實施 8.4.1儀器各單元開機性能確認 a)泵及進樣器:打開電源開關，泵及進樣器進行自檢，并顯示主畫面。 b)檢測器:打開電源開關，檢測器燈打開，并進行自檢6min，氘燈在三個內置波長257nm、521nm、656nm處校準，若偏差小于?1nm，自檢通過，若大于1nm，出現自檢錯誤提示。 8.4.2泵流量設定值誤差和流量穩定性誤差的確認 a)測試條件:流動相:超純水;色譜柱:4.6mm250mm;溫度:室溫。 b)測試方法:

11、 啟動儀器，以水作為流動相，待壓力穩定后，在流動相出口處用稱重過的10ml容量瓶收集流動相，同時用秒表計時，收收集五分鐘流出的流動相，精密稱定，每個流速測定三次，記錄測試溫度，按下列計算流量設定值誤差S1和穩定性誤差S2。 SS = (Fm -Fs) / Fs100% FmSR =(Fmax-Fmin)/100% 式中:SS為泵流量設定值誤差(%); R為流量穩定性誤差(%); SFm=(W2-W1)/(t),為流量實測值(ml/min); W2容量瓶+流動相(g); W1容量瓶的質量(g); Fs流量設定值 3 實驗室溫度下水的密度(g/cm ); t收集流動相的時間(min); Fm 同一

12、組測量值的算術平均值(ml/min); Fmax同一組測量中流量最大值(ml/min); Fmin同一組測量中流量最小值(ml/min)。 c)測試標準: 流量設定值F(ml/min) 0.500 1.000 1.500 測量次數 3 3 3 收集流動相時間(min) 25 15 10 允許誤差 5% 3% 3% SS 3% 2% 2% SR 8.4.3梯度準確度的確認 a)測試條件: 流動相:0.3%丙酮-水 檢測波長:254nm 流速:1.000ml/min 柱溫:30?。 第 6 頁 共 17 頁 b)測試方法: 按下表設置梯度洗脫順序，以兩通代替色譜柱連接管路，先用超純水沖洗系統，待基

13、線平穩后開始執行梯度程序，畫出梯度變化曲線，測定三次，取各梯度級高度的平均值，由曲線圖測量100%B(C)梯度級平均高度各梯度級實際體積%，每個梯級的理論體積%和實際體積%之差即為梯度準確度，以最大差值為梯度準確度誤差。 梯度洗脫表 時間 A通道(C通道):超純水 B通道(D通道):0.3%丙酮水溶液 0.00min 100% 0% 3.00min 100% 0% 6.00min 0% 100% 9.00min 0% 100% 9.01min 20% 80% 12.00min 20% 80% 12.01min 40% 60% 15.00min 40% 60% 15.01min 60% 40%

14、18.00min 60% 40% 18.01min 80% 20% 21.00min 80% 20% 21.01min 100% 0% 24min 100% 0% c)測試標準:梯度準確度誤差?1%。 8.4.4自動進樣器精密度的確認 a)測試條件: 流動相:甲醇-水(20:80) 對照品:0.25mg/ml甲硝唑對照溶液 色譜柱:C18色譜柱 檢測波長:320nm 進樣量:20l 流速:1.000ml/min 柱溫:37? b)測試方法: 對照品置于進樣瓶，共進樣6針，記錄峰面積，求6針RSD。 c)測試標準:RSD?1.5% 8.4.5自動進樣器線性的確認 a)測試條件: 流動相:甲醇-水

15、(20:80) 對照品:0.25mg/ml甲硝唑對照溶液 色譜柱:C18色譜柱 檢測波長:320nm 進樣量:(1、5、10、15、20)l 流速:1.000ml/min 柱溫:37? b)測試方法: 對照品置于進樣瓶，不同進樣量各進一針，記錄峰面積，求進樣量與峰面積的相關系數。 c)測試標準:相關系數r?0.999 8.4.6檢測器波長準確度的確認 以水流過流通池做一空白掃描，然后以手動的方式將甲硝唑對照品用水稀釋10倍后注入流通池，掃描250nm-400nm波長范圍內的吸收情況，得到甲硝唑溶液在紫外可見光區的吸收光譜曲線。記錄其第 7 頁 共 17 頁 在275nm、300nm、320nm

16、、350nm附近波長處的最大或最小吸收波長，分別找出各點最大或最小波長與標準波長之差即為波長示值誤差;重復測定三次，各點最小與最大之差即為波長重復性誤差。 檢測器波長的示值誤差1和重復性誤差2 波長 275nm附近(max) 300nm附近(min) 320nm附近(max) 350nm附近(min) 實測波長 標準波長 272nm 302nm 320nm 360nm 測定次數 3 3 3 3 示值誤差1 重復性誤差2 8.4.6基線漂移和極限噪聲的檢定 a) 測試條件: 流動相:甲醇-水(20:80) 對照品:0.25mg/ml咖啡因對照溶液 色譜柱:C18色譜柱 檢測波長:320nm 進樣

17、量:20l 流速:1.000ml/min 柱溫:37? b)測試方法: 將儀器各部分連接好，開機，記錄基線30-40分鐘，計算基線漂移和噪聲。 c)測試標準:基線噪聲:?1.010-4AU;基線漂移:?1.010-4AU/hr。 8.4.7檢測器線性的確認 a)測試條件: 流動相:甲醇-水(20:80) 對照品:(5、10、25、50、100)g/ml咖啡因對照溶液 色譜柱:C18色譜柱 檢測波長:320nm 進樣量:20l 流速:1.000ml/min 柱溫:37? b)測試方法: 5個濃度對照品置于不同進樣瓶中，各進一針，記錄峰面積，求個對照品濃度與峰面積的相關系數 c)測試標準:相關系數

18、r?0.999 8.4.8最小檢測濃度的確認 a)測試條件: 流動相:甲醇-水(20:80) 對照品:110-7g/ml甲硝唑對照溶液 色譜柱:C18色譜柱 檢測波長:320nm 進樣量:20l 流速:1.000ml/min 柱溫:37? b)測試方法: 以流動相沖洗系統至基線平穩后，進樣，記錄色譜圖，由色譜圖峰高及基線噪音，按下式計算最 小檢測濃度C 2N C C = H 式中:C最小檢測濃度，g/ml N基線噪音峰度，mAU C標準溶液濃度，g/ml 第 8 頁 共 17 頁 H標準溶液色譜峰高，mAU c)測試標準:?110-8g/ml咖啡因溶液。 8.4.9 運行確認評價及結論 9.

19、性能確認(適用性試驗) 9.1檢查項目:甲硝唑氯化鈉注射液中甲硝唑含量的測定。 9.2 檢查的目的和標準: 檢查儀器在測試供試品的過程中，含量測定的相對偏差。檢查依據為中國藥典2010年版二部。 9.3驗證所需要的材料和儀器(同運行確認)。 9.4測定方法 a)測定條件:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水(20:80)為流動相，檢測波長為320nm，溫度為37?，理論板數按甲硝唑計算不得少于2000。 b)對照品溶液的配制:精密稱定甲硝唑對照品約25 mg，精密稱定，置于100ml容量瓶中，加流動相(甲醇-水(20:80)溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液(0.25mg/ml)。 c

20、)供試品溶液的制備:精密量取本品5ml置100ml容量瓶中，加流動相(甲醇-水(20:80)稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液(0.25mg/ml)。 d)測定:精密量取對照品和供試品各20l注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。 C標 A樣C6H9N3O3)%= 甲硝唑(A標C樣 式中: A樣 為供試品的峰面積; A標 為對照品的峰面積; C樣 為供試品的濃度; C標 為對照品的濃度。 e)測定標準:含甲硝唑應為標示量的93.0%107.0%。 10. 擬訂再驗證項目及周期 設備動力、質量部根據設備儀器情況，確定再驗證周期項目及周期(附件6)，報驗證委員會審核。 11.驗

21、證評價及結論(附件5) 附件: 1驗證方案申請及批準書(附件1) 2關鍵性儀表及消耗性備品情況(附件2) 3儀器組成信息及性能、質量及適用性評價表(附件3) 4儀器安裝條件檢查記錄(附件4) 5驗證評價及結論(附件5) 6再驗證項目及周期(附件6) 7驗證證書(附件7) 第 9 頁 共 17 頁 附件1. 儀器驗證方案申請及批準書 驗證方案名稱 Agilent1200高效液相色譜儀驗證方案 擬驗證時間 驗證方案號 放置地點 精密儀器室 驗證負責人 驗證參加人員 驗證內容 (參數) 驗證依據 驗證方案 (輔助資源) 起草人 部門 年 月 日 驗證委員會 審 批 驗證委員會: 年 月 日 第 10

22、 頁 共 17 頁 附件2. 關鍵性設備及消耗性備品情況 儀器名稱 高效液相色譜儀 型 號 Agilent1200 制造廠商 儀器編號 生產日期 企業編號 使用科室 質檢中心 放置地點 精密儀器室 設備名稱 生產廠家或型號 校正證書編號 保存處 校正周期 關 鍵 性 設 備 品 名 生產廠家和型號 單 位 數 量 保存處 消 耗 性 備 品 確 認 使用部門 設備動力部 質管部 年 月 日 年 月 日 年 月 日 第 11 頁 共 17 頁 附件3. 儀器組成信息及性能、質量及適用性評價表 儀器名稱 高效液相色譜儀 型 號 Agilent1200 制造廠商 儀器編號 生產日期 企業編號 使用科

23、室 質檢中心 放置地點 精密儀器室 儀器的完整性 檢查結果 儀器的旋鈕，按鍵，開關是否正常 儀器各部件接頭是否緊密，牢固 儀器是否密閉 儀器組成信息及性能 主機 輔件 性 能 質 量 要 求 評價 結果 確 認 使用部門 質管部 驗證委員會 年 月 日 年 月 日 年 月 日 第 12 頁 共 17 頁 附件4. 儀器安裝條件檢查記錄 Agilent1200 儀器名稱 高效液相色譜儀 型 號 制造廠商 儀器編號 生產日期 企業編號 精密儀器室 使用科室 質檢中心 放置地點 設備條件要求 實際條件 溫度 15,35? 濕度 35%,75% 電壓 220V?22V 工作臺不受陽光直射。 室內應無腐

24、蝕性氣體或其它影響測定的氣體干擾。 周圍應無影響測定的強電場、磁場 周圍應無強烈震動。 排風裝置良好 其 它 條 件 確 認 使用部門 質管部 驗證委員會 年 月 日 年 月 日 年 月 日 第 13 頁 共 17 頁 附件5. 驗 證 記 錄 驗證對象 Agilent1200高效液相色譜儀 驗證時間 驗證方法 驗證編號 溫度 相對濕度 驗證方法描述: 驗證記錄: 序號 檢測參數 參數標準值 檢測結果 (或前次檢測結果) 檢測: 年 月 日 審核: 年 月 日 數據分析處理: 分析人: 年 月 日 驗證評價及結論 科室負責人: 年 月 日 第 14 頁 共 17 頁 備注: 附件6. 再驗證項

25、目及周期 設備編號 設備名稱 高效液相色譜儀 型號 Agilent1200 序號 項目 標準 驗證方法 周期 1 線路連接 2 附件檢查 3 清潔 4 外觀檢查 4 1次/月 5 功能試驗 方法、結果 6 7 8 9 確認 使用部門 設備動力部經理 驗證委員會 年 月 日 年 月 日 年 月 日 第 15 頁 共 17 頁 驗證證書 設備編號: 設備名稱 高效液相色譜儀 型 號: Agilent1200 上述設備已按驗證方案進行驗證，各項驗證結果符合標準要求， 批準使用。 驗證報告名稱: 驗證報告編號: 驗證完成日期: 有 效 期: *制藥股份有限公司 驗證委員會 年 月 日 備注: 1. 設備應在當前驗證條件下使用，使用條件發生變更，應報驗證委員會審核，必要時重新檢定或驗證。 2. 設備應按批準的標準操作、維護保養程序進行操作、維護和保養。 附錄7. 第 16 頁 共 17 頁 第 17 頁 共 17 頁